Наше исследование показало, что повышенная экспрессия Bax в СОЯ старых мышей SHR является, возможно, одним из факторов, опос­редующих высокий уровень клеточной смерти. Кроме того, мы обнаружили значительное снижение уров­ня Вах в НСК трансгенных мышей только в ПВЯ. Возможно, это подавление синтеза Вах связано с по­казанной нами ранее HER2/neu-зависимой супресси­ей р53 и, далее, caspase-8 [1]. Caspase-8 (FLICE), как

Е.Д. Бажанова и др.

известно, может активировать экспрессию Bax через расщепление Bid [5]. Однако значительное число апоп-тоз-регулирующих факторов, изученных в НСК, ясно показывает, что регуляционные пути апоптоза в разных НСЦ различаются.

Изучение экспрессии с-RaM показало, что сни­женный синтез этого белка в ПВЯ трансгенных мышей не вносит вклад в поддержание низкого уровня апоптоза в данном ядре. В классической модели взаимодействия Ras/Raf пути, приводящие к активации Raf, включают в себя фосфорилирование рецепторов фактора роста, в частности, EGFR [21]. Как известно, c-Raf-1, up-регулирующая киназа Raf/MEK/ERK пути, явля­ется важным медиатором многих сигналов выживания клетки, и ее защитное действие зависит в основном от взаимодействия c-Raf c Bcl-2 и активации PI3K/Akt и PKB/Akt сигнальных путей [16, 25]. Можно пред­положить, что в клетках ПВЯ мышей HER2/neu, где экспрессия c-Raf-1 ниже, чем в ПВЯ мышей SHR, но нет активации апоптоза, антиапоптотический эффект HER2/neu происходит через Raf/MEK/ERK-неза-висимые пути, но с тем же результатом, что и активация PDK-пути выживания клетки. Возможно, снижение экспрессии Bcl-2 в клетках ПВЯ трансгенных мышей [1] связано именно с подавлением с-Raf-1-киназы.

В настоящее время есть данные о наличии рецепто­ров к эстрадиолу (РЭ) в СОЯ и ПВЯ млекопитающих [14], что является доказательством возможности этих клеток отвечать на циркулирующий в крови 17|3-эст-радиол. Также известна возможность 17|3-эстрадио-ла влиять на уровень клеточной смерти гипофизарных нейронов путем регуляции экспрессии белков - членов семейства Bcl-2 [13]. Другие авторы также показали антиапоптотический эффект 17|3-эстрадиола в нейронах неокортекса, не связанный с изменениями экспрессии Bcl-2 или Bax [4]. Обнаружено, что активированные РЭ-альфа могут кооперироваться с димеризованными ErbB2, что приводит к активации PI3K- и Akt-путей выживания клетки [22]. Итак, стабильный уровень 17|3-эстрадиола в плазме крови дополняется сверхэкс­прессией одного из основных партнеров РЭ проведения сигнала, HER2, что интенсифицирует потенциал кле­точного выживания.

Результаты нашего исследования уровня 17|3-эс-традиола в плазме крови мышей SHR и HER2/neu приводят к заключению, что, вероятно, данный гормон играет важную роль в повышении выживания НСК у мышей HER2.

Интенсивность синтеза ВП в НСК является широ­ко распространенным критерием их физиологического статуса [2], который может изменяться под действием различных стресс-факторов [3]. Можно предполо­жить, что постоянный уровень экспрессии ВП в изуча­емых ядрах, сохраняемый в течение жизни животного, отражает тот факт, что интенсивный апоптоз у старых мышей SHR происходит в основном вследствие внут­ренней суицидальной программы, а не из-за внешних влияний. Иначе говоря, функциональная дисрегуляция, вызываемая какими-либо стрессорными факторами, должна производить повреждения синтеза ВП.

Мы выявили, что сверхэкспрессия HER2 вызывает увеличение синтеза ВП в НСЦ, независимо от возрас­та животного. По данным многих авторов, ВП является активным митогеном, он активирует фосфорилирование EGFR [7]. Митогенный эффект ВП опосредуется ак­тивизацией двух путей: MAPK-сигнального и PI3K. В результате индуцируется синтез ДНК и клеточная пролиферация [8, 9]. Кроме того, некоторые авторы сообщают о параллельном увеличении количества ре­цепторов к ВП и EGFR при некоторых патологических состояниях [10]. Такие тесные связи ВП и EGFR поз­воляют предположить, что зависимость между этими веществами является двусторонней. Таким образом, мы показали, что дополнительная активность гена her2/ neu у трансгенных животных влияет на основную фун­кцию НСК.

Итак, на основании полученных данных можно сделать следующие выводы. Основным механизмом подавления апоптоза у трансгенных мышей является блокирование р53-зависимого каскада, что приводит к снижению синтеза caspase-8 и, соответственно, Вах, к дисбалансу антиапоптотических белков Bcl-2 и Mcl-1. Одним из важных факторов, принимающих участие в предупреждении гибели клеток гипоталамической НЭС у трансгенных животных, является 17|3-эстради-ол, уровень которого в плазме крови не снижается при старении. Кроме того, у HER2 мышей, независимо от возраста, интенсифицируется синтез ВП, являющегося активным митогеном. Результатом всего этого являет­ся повышенное выживание НСК старых трансгенных мышей.

Авторы благодарны Г.Б. Белостоцкой за помощь при анализе изображений и Е.В. Черниговской за лю­безно предоставленные антитела к c-Raf-1.

Литература

1. Бажанова Е.Д., Молодцов В.Н., Попович и.Г., Анисимов В.Н. Возрастные особенности экспрессии белков-маркеров апоптоза у трансгенных мышей HER2/neu // Морфология.- 2007.-Т. 131, № 3.-C. 30-33.

2. Поленов А.Л., Константинова М.С., Гарлов П

1 2 3 4 5 6 7 8 9 10 11 12 13 14 15 16 17 18 19 20 21 22 23 24 25 26 27 28 29 30 31 32 33 34 35